Vis enkel innførsel

dc.contributor.advisorDalmo, Roy
dc.contributor.authorHynes, Natasha
dc.date.accessioned2012-01-11T13:33:37Z
dc.date.available2012-01-11T13:33:37Z
dc.date.issued2011-10-18
dc.description.abstractFlagellin is the principal structural protein in the locomotive organ flagellum present on flagellated bacteria, and is known to be an important evolutionarily conserved PAMP. Flagellin has been shown to bind to the PRR TLR5 which induces innate immune system responses and signaling pathways. In mammals, much focus has been placed on this protein in vaccine studies for its possible function as an adjuvant. Flagellin (FlaD from Vibrio anguillarum) was recombinantly produced in two forms, full-length (FDL) and a truncated form (FDS) with portions of the N- and C-termini removed to prevent polymerization. Both forms of flagellin were tested alone and in combination with an antigen in a dose response study to determine the most effective dosage to produce a strong immune response. A polyclonal antibody for FDS was produced and showed good specificity in immunoblot testing. Cell culture was used to compare the NF-κB response after stimulation with FDL versus FDS and resulted in a significantly larger response in cells stimulated with FDL. QPCR mRNA gene expression results showed a strong innate immune response with a number of genes known to be induced downstream by the TLR signaling pathway up- regulated including important TLR5S and inflammatory cytokines and chemokines (TNFα, IL-6, IL-8, IL-1β). Microarray analysis of salmon injected with flagellin caused reproducible gene up-regulation of inflammatory cytokines, chemokines and receptors (IL-8, TNFRSF11B, IL-1R), antimicrobial peptides (hepcidin, cathelicidin), immune genes (C/EBP, thioredoxin, C-type lectin receptor B), complement genes (complement component C7 and C7-1), peptidases (MMP-9) and genes involved in the Ras/MAPK pathway (Ras-related proteins). Down-regulation of interesting immune genes also occurred including myxovirus resistance 1, clusterin-1 and LPS-induced TNF-α homolog. Some genes exhibited early, delayed or extended response over the sampling time and flagellin seemed to be the key component to eliciting a response. Flagellin was shown to induce innate immune responses in Atlantic salmon.en
dc.description.doctoraltypeph.d.en
dc.description.popularabstractBakterie-flagellin. – Et hittil ukjent hjelpestoff til bruk i vaksinerings-strategier Forsvaret for graden Philosophiae Doctor vil bli holdt i to deler; med prøveforelesning 17. november 2011, mens presentasjon av doktorgradsarbeidet, og utspørring av kandidaten vil skje den 18. november, 2011. Tittel på prøveforelesningen er “Adverse effects of vaccination” mens avhandlingens tittel er " Bacterial flagellin- a novel adjuvant for vaccine strategies.” Norge har blitt en av verdens største produsenter av atlantisk laks, en utvikling som ikke har vært uten utfordringer, blant annet i bekjempelse av utallige sykdommer. Vaksinering har vært et effektivt middel for å redusere mange bakterielle sykdommer. Virussykdommer er derimot fortsatt et problem for oppdretterne. Det er derfor behov for mer effektive vaksiner som er i stand til å beskytte mot virus og intracellulære bakteriesykdommer i lakseoppdrett. I dette doktorgradsarbeidet ble flagellin, som er det strukturelle proteinet i bakerienes bevegelsesorgan, eller “hale”, flagellen, produsert ved hjelp av rekombinant protein teknologi. Dette proteinet er viktig i stimuleringen av det medfødte immunforsvaret og resultater fra mammalsk forskning har vist at proteinet virker lovende til bruk som en adjuvans. En adjuvans hjelper vaksinen slik at virkningen av denne blir mer effektiv. Laksens immunrespons etter injeksjon av flagellin ble studert ved hjelp av bioteknologiske metoder som luciferase assay, kvantitativ real time polymerase chain reaction (QPCR) og microarray-analyser. Studiet viste at flagellin induserer det medfødte immunforsvaret hos laks, og dermed er en lovende kandidat for videre vaksinestudier. Mitt navn er Natasha Hynes, og jeg ble født 20. februar 1981 i Stephenville, Newfoundland, Canada. Jeg fullførte min bachelorgrad i biologi (2003) ved St. Francis Xavier University, Nova Scotia, Canada, avansert grad i bærekraftig akvakultur (2005) fra Marine Institute, Canada Memorial University of Newfoundland, Master i marin akvakultur (2007) fra Universitetet av Nordland, Bodø, Norge og nå endelig graden philosophiae doctor i biologi fra Universitetet i Tromsø (2011). Natasha Hynes University of Tromsø, Faculty of Biosciences, Fisheries and Economics Work: 77645577 Mobile: 97607534 natasha.hynes@uit.noen
dc.description.sponsorshipFunding by the Norwegian Research Council under the FUGE program (contract number 183772/s10).en
dc.descriptionThe papers of this thesis are not available in Munin: <br/>1. Natasha A. Hynes, Clemens Furnes, Børge Nilsen Fredriksen, Tori Winther, Jarl Bøgwald, Atle N. Larsen, Roy A. Dalmo: 'Immune response of Atlantic salmon to recombinant flagellin', Vaccine (2011) vol. 29, no 44, pp 7678–7687. Available at <a href=http://dx.doi.org/10.1016/j.vaccine.2011.07.138>http://dx.doi.org/10.1016/j.vaccine.2011.07.138</a> <br/>2. Natasha A. Hynes, Tiago S. Hori, Roy A. Dalmo and Matthew L. Rise: 'Functional genomics analysis of the immunological responses of Atlantic salmon (Salmo salar) spleen to injection with recombinant flagellin from Vibrio anguillarum' (manuscript)en
dc.identifier.isbn978-82-8266-018-1
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/10037/3798
dc.identifier.urnURN:NBN:no-uit_munin_3509
dc.language.isoengen
dc.publisherUniversity of Tromsøen
dc.publisherUniversitetet i Tromsøen
dc.rights.accessRightsopenAccess
dc.rights.holderCopyright 2011 The Author(s)
dc.rights.urihttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0en_US
dc.rightsAttribution-NonCommercial-ShareAlike 3.0 Unported (CC BY-NC-SA 3.0)en_US
dc.subjectVDP::Teknologi: 500::Bioteknologi: 590en
dc.titleBacterial flagellin : a novel adjuvant for vaccine strategiesen
dc.typeDoctoral thesisen
dc.typeDoktorgradsavhandlingen


Tilhørende fil(er)

Thumbnail
Thumbnail

Denne innførselen finnes i følgende samling(er)

Vis enkel innførsel

Attribution-NonCommercial-ShareAlike 3.0 Unported (CC BY-NC-SA 3.0)
Med mindre det står noe annet, er denne innførselens lisens beskrevet som Attribution-NonCommercial-ShareAlike 3.0 Unported (CC BY-NC-SA 3.0)