Isolering og karakterisering av antibakterielle forbindelser i sjøstjernene: Urasterias linckii, Solaster endeca og Crossaster papposus

Abstract

Antibakteriell aktivitet mot Gram positive og Gram negative bakterier er påvist i ekstrakter av celler og plasma fra Solaster endeca, Crossaster papposus og Urasterias Linckii. Det har også blitt påvist antibakteriell aktivitet mot Gram negative bakterier i ekstrakter av hel kropp fra Solaster endeca og Croassaster papposus. Materialet ble grovekstrahert med 60 % Acetonitril, videre ble vannfase og organisk fase ble separert. Ved hjelp av fastfase ekstraksjon ble vannfasen fraksjonert med 0,05 % trifluoreddiksyre i Acetontril med trinnvis økende volumprosent. Bioaktive-eluater fra fastfase ekstraksjonen ble videre separert på omvendt fase HPLC-kolonne med samme mobilfase bestående av Acetonitril/vann med 0,05 % trifluoreddiksyre og. Analyse av aktive HPLC-fraksjoner ble utført ved ESI-MS i positiv modus, og MS/MS-analyse ble utført på Q-TOF. ESI-MS analyse av en HPLC-fraksjon fra S. endeca celler indikerte at man har et antibakteriell peptid på rundt 12315 Da. Etter trypsinering og påfølgende LC-MS/MS analyse ble sekvens av 2 peptidfragmenter bestemt. UV-spekter (fra HPLC separasjonen) og MS-spekter av fraksjonene fra hel kropp S. endeca og C. papposus indikerer tilstedeværelse av Riboflavin lignende substanser med antibakteriell aktivitet. Fra aktive HPLC-fraksjoner fra helkropp C. papposus fikk man 3 forbindelser med masse på 2338, 2485 og 3094 Da.